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結合微生物學及光譜學,研究thymol對金黃色葡萄球菌抗菌機理

返回列表 來源: 發布日期: 2020.01.09
結合微生物學、光譜學和分子對接技術,研究thymol對金黃色葡萄球菌抗菌機理
解讀人:上海梵藍 
這篇文章用多種技術展現了 thymol 對革蘭氏陽性菌金黃色葡萄球菌抗菌的物理狀態,主要有電鏡圖片展示,以及 thymol 對該菌 DNA 的結合等一些情況。
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百里酚(2-異丙基-5-甲基苯酚)是一種天然物質食品中用作香料或防腐劑的成分。這次試驗中通過氣相色譜-質譜共鑒定出金黃色葡萄球菌膜上 15 種膜脂肪酸。低濃度的百里酚明顯的改變在膜脂肪酸組成,如降低 12-甲基十四碳酸(從 22.4-17.3%降至 7.9-10.3%)。膜透性測定和形態學圖像顯示,百里酚在高濃度下破壞了金黃色葡萄球菌細胞膜的完整性,此外,通過多光譜技術,原子力顯微鏡,顯示百里酚誘導細菌基因組 DNA 二級結構輕微的不穩定。
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文章背景
這篇文章從食品病原菌引起人們的腹瀉、瘧疾、中毒等角度出發,包括單核增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、大腸桿菌,而化學防腐劑的使用是控制不良食品相關微生物的傳統方法。然而,這些防腐劑可能會引發中毒危害,導致嚴重的健康問題,因此,探索自然的方法來消除致病性和食品中的腐敗微生物是未來選擇。這個時候就引出了本文的重要角色 thymol。此外,它被被美國食品藥品管理局歸類為 b 類,認定為安全的。具體來說,百里酚具有干擾細胞膜脂質雙分子層的能力,可能導致細胞膜通透性增加。

材料與方法
Thymol (purity, 99.0%)從 Aladdin Chemistry Co.獲得 (Shanghai, China)金黃色葡萄球菌從華南理工大學微生物實驗室獲得(Guangzhou, China)
金黃色葡萄球菌生長曲線
此前,百里酚對金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度為 2.06 mM (0.31 g/L)【1】 ,所以本試驗就用的 2.06mM 作為 1MIC 在酵母培養基中培養。
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膜脂肪酸的提取與分析
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一些研究表示,不同細菌膜脂肪酸比例,影響其自身膜流動性,最終影響菌體結構,所以本次試驗測定脂肪酸作為研究的一個依據。另外,本試驗對細胞膜透性測定使用電導率儀測定(DDS-11A, Shanghai Leici Instrument Inc., Shanghai, China),了解不同 MIC 下金黃色葡萄球菌細胞的胞外傳導性。

掃描電子顯微鏡檢查法
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百里香酚的DNA分子建模
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這個試驗用到了原子力顯微鏡,測定了細菌 DNA 結構,和添加了thymol細菌 DNA 結構,通過探頭激光掃描,認清了加入 thymol 后細菌 DNA 結構凸起更多更粗燥,認定了thymol可結合細菌DNA,可能發生一定的調控作用。

參考文獻:
【1】Trombetta D, Castelli F, Sarpietro MG, Venuti V, Cristani M, Daniele C, et al.Mechanisms of antibacterial action of three monoterpenes. Antimicrob Agents Chemother. 2005;49:2474–8.

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