摘　要： 本試驗旨在研究堅木單寧對育肥豬生長性能、糞便微生物變化及豬肉貨架期的影響。試驗選用75kg左右的健康“杜×長×大”育肥豬 １２０ 頭，隨機分成對照組和試驗組，每組 ６ 個重復，每個重復 １０ 頭豬。 對照組飼喂基礎飼糧，試驗組在基礎飼糧中添加 １ ０００ ｍｇ／ ｋｇ 的堅木單寧。 試驗期為 ３５ ｄ。 結果表明：１）與對照組相比，飼糧添加堅木單寧對育肥豬糞便含水量沒有顯著影響（Ｐ＞０．０５），但試驗組育肥豬糞便中大腸桿菌數量顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５）；２）與對照組相比，試驗組育肥豬平均日采食量和平均日增重極顯著高于對照組（Ｐ＜０．０１），料重比顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５）；３）試驗組豬肉的感官評分、ｐＨ 和揮發性鹽基氮（ＴＶＢ?Ｎ）含量在 ４ ℃貯藏的前 ３ ｄ 與對照組相比沒有顯著差異（Ｐ＞０．０５），５ ｄ 后感官評分顯著高于對照組（Ｐ＜０．０５），ｐＨ和 ＴＶＢ?Ｎ 含量顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５），且第 ９ 天時 ｐＨ 和 ＴＶＢ?Ｎ 含量極顯著低于對照組（Ｐ＜０．０１）；４）豬肉在 ４ ℃貯藏過程中，細菌總數呈現對數上升，試驗組豬肉在貯藏前 ５ ｄ 與對照組差異不顯著（Ｐ＞０．０５），７ ｄ 后顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５）。 由此可見，飼糧中添加 １ ０００ ｍｇ／ ｋｇ的堅木單寧能提高育肥豬的生長性能，降低糞便中大腸桿菌數量，延長豬肉的貨架期。

關鍵詞： 堅木單寧；育肥豬；生長性能；糞便微生物；豬肉貨架

作者：蘇成文、宋之波、徐相亭 、陳焱、丁玉娟、郭洪梅、黃加珍

 

單寧（ｔａｎｎｉｎ）是植物中的一類結構復雜的多酚類化合物，廣泛存在于薔薇科、楊柳科、桃金娘科和山毛櫸科等植物中，其中，植物皮中的含量最高。 單寧提取物為黃色或棕黃色粉末，在空氣中其顏色因氧化而逐漸變深。 單寧在自然界的分布很廣，其用途主要集中在食品、醫藥、造紙、革鞣、橡膠、冶金、印染、化妝品及水處理等領域。 近年來，單寧作為飼料添加劑應用的研究日益增加。人們逐漸認識了單寧的抗菌活性，單寧對細菌、真菌和酵母生長有抑制作用，能有效抑制經采食攝入的病原菌在豬腸道中的定植；栗木單寧和堅木單寧能有效抑制沙門氏菌繁殖；栗木單寧對產氣莢膜梭菌及其毒素有明顯抑制作用；堅木單寧對保育豬和育肥豬腸道大腸桿菌有較好抑制作用，單寧對大腸桿菌最小抑菌濃度為０．２５ ｍｇ／ ｍＬ。 單寧對動物生產性能影響的研究也已開始，飼喂適量單寧，肉仔雞后期腸道中的淀粉酶和胰蛋白酶活性顯著提高，生長速度和飼料報酬顯著改善；堅木單寧可以提高保育后期和育肥期的平均日采食量（ＡＤＦＩ） 和平均日增重（ＡＤＧ）；但高濃度單寧能夠與唾液黏蛋白結合，產生澀味，會降低動物采食量；過量的單寧與蛋白質等營養物質結合后，影響營養物質在消化道中降解，進而影響其消化率 ；短時間內采食大量含高單寧的飼糧還會造成反芻動物急性中毒；劉樹棟等認為植物單寧在仔豬飼糧中最佳添加劑量為 １ ５００ ｍｇ／ ｋｇ。 此外，單寧還具有清除動物體內自由基和抗氧化作用 ；單寧能緩解食品和飼糧中維生素 Ｅ 的氧化，羔羊飼糧中添加單寧能改善肌肉的抗氧化狀態，綿羊飼喂單寧提高了羊肉色澤在冷藏條件下的穩定性。然而，關于堅木單寧對豬育肥后期生長性能和豬肉貨架期影響的研究還很少，因此，本試驗擬考察堅木單寧對豬育肥后期的飼養效果，并研究飼喂堅木單寧的育肥豬豬肉在貯藏期間感官評分、揮發性鹽基氮（ＴＶＢ?Ｎ）含量、ｐＨ 和細菌總數的變化規律，為堅木單寧作為飼料添加劑應用提供理論依據。

 

１　材料與方法

１．１　堅木單寧

試驗用堅木單寧產自阿根廷ＵＮＩＴＡＮ公司，提取來源為該公司自有的堅木森林，主要成分單寧酸含量在 ７５％以上。

１．２　試驗設計

試驗選用 ７５ ｋｇ 左右的“杜×長×大”健康育肥豬１２０頭（公母各占１／２），隨機分成 ２ 組，每組 ６個重復，每個重復 １０ 頭豬，養在同一個豬欄中。對照組飼喂基礎飼糧，試驗組飼喂基礎飼糧 ＋１０００ ｍｇ／ｋｇ堅木單寧。試驗期３５ｄ。

１．３　基礎飼糧組成及營養水平

基礎飼糧參照 ＮＲＣ（２０１２）７５～１００ ｋｇ階段營養需要配制，其組成及營養水平見表１。

１．４　飼養管理

試驗在山東省昌邑市三禾養殖場進行。 試驗前豬舍嚴格消毒，每天保持豬舍清潔衛生。 試驗豬群由同一飼養員飼養，自由采食，自由飲水。

１．５　測定指標及方法

１．５．１　糞便大腸桿菌數量

于試驗階段的前 ３ ｄ 和后 ３ ｄ，早飼后 ３０ ｍｉｎ收集試驗豬群各欄健康豬只剛排出的糞便，豬新鮮糞便于－２０ ℃ 冰箱中保存，于實驗室中檢測糞便含水量，并用普通營養瓊脂培養基測定豬糞便中的大腸桿菌數量，將糞便稀釋 １０ ６ 倍接種，每個樣品接種 ３ 個平板，統計每克糞便樣品中的大腸桿菌數量。

１．５．２　生長性能

于試驗開始和各階段結束時，上午早飼前稱量各欄豬體重，并記錄各欄（重復）試驗豬群的耗料量，計算試驗期每欄試驗豬的 ＡＤＧ、ＡＤＦＩ 和料重比（Ｆ／ Ｇ）。

ＡＤＧ＝（各欄豬試驗末體重－各欄豬試驗初體重） ／ （各欄試驗豬頭數×試驗天數）；

ＡＤＦＩ＝各欄豬試驗期耗料量／（各欄試驗豬頭數×試驗天數）；

Ｆ／ Ｇ＝各欄豬試驗期耗料量／各欄豬試驗期體增重

１．５．３　豬肉貨架期

試驗結束后，分別從對照組和試驗組各隨機選取 ３ 頭育肥豬屠宰，將豬肉放入冰箱中于 ４ ℃下冷藏。 每天測定豬肉的感官評分、ｐＨ 和 ＴＶＢ?Ｎ含量等指標。

感官評分：由 ５ 名食品專業人士對豬肉的氣味、組織形態、色澤等指標進行綜合評定，豬肉感官評分標準見表 ２。

ｐＨ 測定：將肉樣剁碎，稱取碎肉樣 １０ ｇ 放于燒杯，加入蒸餾水 １００ ｍＬ，靜置 ３０ ｍｉｎ 后過濾，以酸度計測定的 ｐＨ。

ＴＶＢ?Ｎ 含量測定：按照 ＧＢ／ Ｔ ５００９．４４—２００３的方法進行。

１．６　數據處理

試驗數據用 Ｅｘｃｅｌ ２００７ 整理，結果以“平均值±標準差”表示，用 ＳＰＳＳ １９．０ 統計軟件進行ｔ檢驗，Ｐ＜０．０５ 表示差異顯著，Ｐ＜０．０１ 表示差異極顯著。

 

２　結果與分析

２．１　堅木單寧對育肥豬糞便含水量及大腸桿菌數量的影響

堅木單寧對育肥豬糞便含水量及大腸桿菌數量的影響見表 ３。 由表可知，試驗前和試驗后試驗組與對照組育肥豬糞便含水量差異均不顯著（Ｐ＞０．０５），說明堅木單寧對育肥豬糞便含水量沒有影響；試驗前試驗組與對照組育肥豬糞便大腸桿菌數量差異不顯著（Ｐ＞０．０５），試驗后試驗組育肥豬糞便大腸桿菌數量顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５），說明堅木單寧有抑制育肥豬腸道大腸桿菌繁殖的作用。

２．２　堅木單寧對育肥豬生長性能的影響

堅木單寧對育肥豬生長性能的影響見表 ４。由表 ４ 可知，試驗組育肥豬 ＡＤＦＩ 和 ＡＤＧ 均極顯著高于對照組（Ｐ＜０．０１），說明堅木單寧對育肥豬ＡＤＦＩ 和 ＡＤＧ 有顯著影響，能顯著提高育肥豬采食量和生長速度；試驗組育肥豬 Ｆ／ Ｇ 顯著低于對照組（Ｐ＜０．０５），說明堅木單寧能降低育肥豬 Ｆ／ Ｇ，顯著提高育肥豬的飼料轉化率。

２．３　堅木單寧對豬肉貨架期的影響

２．３．１　堅木單寧對豬肉感官評分的影響

堅木單寧對豬肉感官評分的影響見表 ５。 由表可知，在 ４ ℃貯藏過程中，豬肉感官評分呈現逐漸下降的變化趨勢。 貯藏第 １ 天，對照組與試驗組豬肉感官評分沒有顯著差異（Ｐ＞０．０５），均為 １０分；貯藏第 ３ 天，對照組豬肉感官評分低于試驗組，但差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；之后對照組豬肉感官評分顯著低于試驗組（Ｐ＜０．０５），貯藏第 ５、７、９ 和１１ 天，對照組與試驗組均差異顯著（Ｐ＜０．０５）。

２．３．２　堅木單寧對豬肉 ｐＨ 的影響

堅木單寧對豬肉 ｐＨ 的影響見表 ６。 由表可知，在 ４ ℃貯藏過程中，豬肉 ｐＨ 呈現先下降后上升的變化趨勢，貯藏第 ３ 天時豬肉 ｐＨ 最低，這是由于肉在成熟過程中肌糖原被降解為乳酸所致。貯藏第 １ 天和第 ３ 天，對照組與試驗組豬肉 ｐＨ 基本一致，差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；從第 ５ 天開始，對照組豬肉 ｐＨ 顯著或極顯著高于試驗組（Ｐ＜０．０５或 Ｐ＜０．０１）；第 ５ 天和第 ７ 天，對照組與試驗組豬肉 ｐＨ 差異顯著（Ｐ＜０．０５）；第 ９ 天，對照組與試驗組豬肉 ｐＨ 差異極顯著（Ｐ＜０．０１）；第 １１ 天，對照組與試驗組豬肉 ｐＨ 差異顯著（Ｐ＜０．０５）。

２．３．３　堅木單寧對豬肉 ＴＶＢ?Ｎ 含量的影響

堅木單寧對豬肉 ＴＶＢ?Ｎ 含量的影響見表 ７。由表可知，在 ４ ℃ 貯藏過程中，豬肉 ＴＶＢ?Ｎ 含量呈現逐漸上升的變化趨勢。 貯藏第 １ 天和第 ３ 天，對照組豬肉 ＴＶＢ?Ｎ 含量略高于試驗組，差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；之后對照組 ＴＶＢ?Ｎ 含量上升較快，第 ５ 天和第 ７ 天，對照組顯著高于試驗組（Ｐ ＜０．０５）；第 ９ 天，對照組極顯著高于試驗組（ Ｐ ＜０．０１）；第 １１ 天， 對 照 組 顯 著 高 于 試 驗 組 （ Ｐ ＜ ０．０５）

２．３．４　堅木單寧對豬肉細菌總數的影響

將豬肉細菌總數換算成對數，堅木單寧對豬肉細菌總數的影響見表 ８。 由表可知，在 ４ ℃貯藏過程中，豬肉細菌總數基本呈現對數上升的變化趨勢。 貯藏第 １ 天，對照組豬肉細菌總數略低于試驗組，差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；之后，對照組豬肉細菌總數高于試驗組，但在貯藏第 ３ 天和第 ５ 天，差異不顯著（Ｐ＞０．０５）；第 ７ 天和第 １１ 天，對照組豬肉細菌總數顯著高于試驗組（Ｐ＜０．０５）；而第 ９天 ２ 組差異不顯著（Ｐ＞０．０５），可能是檢測誤差所致。

３　討　論

３．１　堅木單寧對育肥豬糞便大腸桿菌數量的影響

單寧對大腸桿菌的體外抑制作用已十分明確，單寧屬于多酚化合物，其苯環疏水基能和菌體蛋白質分子中苯環、碳氫鏈等疏水基團結合，使蛋白質變性凝固，產生抑菌作用，舒楊雄等 、林款等分別報道了大腸桿菌體外最小抑菌濃度。 目前，單寧在動物體內抑菌機理的報道逐漸增多。 Ｋｒａｕｓｅ 等、劉秀麗認為單寧可通過與大腸桿菌膜蛋白結合的方式使細胞膜通透性降低，從而使細胞內環境穩態失衡，抑制大腸桿菌生長；李海帆等則認為單寧的多酚成分破壞了細菌細胞膜完整性，導致細胞內容物流出，抑制了細菌生長；Ｐａｙｎｅ 等 也證實了單寧酸能通過抑制細菌被膜的形成而抑制其生長；Ｖａｎｂｅｌｌｅ 等認為單寧能夠沉淀細菌酶形成無法溶解的復合物，降低細菌酶的活性，減緩細菌生長速度；單寧能抑 制微生物的氧化磷酸化而影響其代謝，單寧還可以抑制微生物外源酶的活性影響其生長；Ｃｈｕｎｇ 等認為單寧能夠鰲合鐵，使細菌無法利用鐵，進而抑制細菌生長。 許多學者認為單寧酸能夠調節腸道微生物菌群平衡，通過競爭性排除機制進行微生物選擇，抑制特定細菌復制及細胞毒性作用來選擇性增加乳酸菌和雙歧桿菌，抑制腸道有害菌繁殖 ；隋慧等認為雙歧桿菌能在腸黏膜表面形成一層具有屏障保護作用的生物膜，阻止有害菌入侵；劉樹棟等報道，飼糧中添加 １ ０００ ｇ／ ｔ 單寧酸，仔豬腸道乳酸菌數量提高２３７．６６％，大腸桿菌數量降低 ３０．００％。 本試驗中，飼喂堅木單寧育肥豬的糞便大腸桿菌數量顯著低于對照組，證實了單寧在動物體內有抑制腸道大腸桿菌繁殖的作用。

３．２　堅木單寧對育肥豬生長性能的影響

傳統上，單寧被認為是單胃動物的抗營養物質，能減少動物采食量、飼料消化率和生產性能。但低濃度單寧適度的澀味能夠改善飼糧的適口性，刺激單胃動物的食欲，提高采食量，進而促進單胃動物生長；單寧還可以減緩腸道蠕動，降低食糜通過小腸的速度，提高飼糧消化率。飼糧中添加單寧能降低肉雞腸道內 ｐＨ，改善腸道內環境，促進腸道發育，顯著增加十二指腸和空腸腸絨毛高度（隱窩深度） ；吳姝等在飼糧中添加植物多酚顯著提高了肉雞回腸絨毛高度；孫丹鳳、李登輝和原澤鴻均報道了多酚對腸道的改善作用。 單寧能改善斷奶仔豬腸道絨毛形態 ；鄧文等、Ｚｈｕ 等證實飼糧中添加栗樹水解單寧能改善斷奶仔豬腸道絨毛形態。 單寧還能有效提高小腸淀粉酶和胰蛋白酶活性；孫展英等證實斷奶仔豬飼糧中添加單寧酸能提高仔豬胃蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等消化酶活性；劉華偉報道飼糧中添加單寧顯著提高了肉兔十二指腸、空腸和回腸淀粉酶活性，同時提高了十二指腸和空腸中胰蛋白酶的活性。 本試驗中，飼喂堅木單寧的育肥豬 ＡＤＦＩ 和 ＡＤＧ 得到極顯著提高，Ｆ／ Ｇ顯著降低，生長性能顯著改善，這與多數報道一致，為堅木單寧作為飼料添加劑的商業化提供了依據。

３．３　堅木單寧對豬肉貨架期的影響

許多研究證實植物多酚具有清除自由基、抗氧化方面的作用。Ｋｕｓｚｎｉｅｒｅｗｉｃｚ 等 認為植物多酚的抗氧化作用主要是其結構中包含多個易被氧化的酚輕基，可直接與自由基和氧化物結合，抑制脂質過氧化。 單寧屬于植物多酚，單寧的抗氧化性能在食品工業和醫學領域中已被廣泛應用。 單寧的抗氧化性可以通過還原反應降低環境中的氧含量，也可以通過作為氫供體捕捉氧負離子和羥基自由基等中斷氧化過程；單寧還能夠抑制產生活性氧的細胞色素還原酶起到抗氧化的作用。 單寧在甲基紫體系、水楊酸體系、鄰苯三酚自氧化體系和亞油酸脂質過氧化體系中都有很強的抗氧化能力，可以防止體內超氧化物歧化酶、谷胱甘肽轉移酶活性的降低，抑制脂質過氧化，因此，單寧可以保護動物機體免受氧化損傷。 單寧作為生物抗氧化劑的潛力被許多體外研究證實 。 其體內抗氧化活性的研究也有報道，吳姝等研究表明植物多酚可一定程度上抑制肌紅蛋白過氧化成高鐵蛋白，使雞肉保持肉色穩定性，失水率和滴水損失也顯著降低；蔣守群在肉雞飼糧中添加大豆異黃酮可使宰后 ２４ ｈ 時肉雞胸肌的肉色紅度（ａ ? ）值略有增高，同時使胸肌系水力提高；宋揚等在飼糧中添加泡桐花黃酮提取物改善了肉雞肌肉的系水力；李紅等報道飼糧中添加 ０．３％的板栗多酚能夠顯著提高肉雞抗氧化能力；單寧可以提高牛羊血清和肝臟抗氧化能力，能改善羔羊肌肉的抗氧化狀態，綿羊飼喂白堅木源單寧，羊肉色澤在冷藏條件下的穩定性得到提高。 本試驗中，飼喂堅木單寧的育肥豬豬肉在 ４ ℃ 貯藏過程中，感官評分和ＴＶＢ?Ｎ 含量下降速度較慢，而 ｐＨ 和細菌總數上升較慢，證實堅木單寧飼喂育肥豬可以延長豬肉貨架期。

 

４　結　論

① 育肥后期飼糧中添加 １ ０００ ｍｇ／ ｋｇ 堅木單寧對育肥豬糞便含水量沒有顯著影響，但顯著降低了糞便中大腸桿菌數量，改善了腸道菌群。

② 堅木單寧使得育肥豬 ＡＤＦＩ 和 ＡＤＧ得到極顯著提高，Ｆ／ Ｇ 則顯著降低，堅木單寧顯著提高了豬育肥后期的生長性能。

③ 飼喂 １ ０００ ｍｇ／ ｋｇ 堅木單寧的育肥豬豬肉，在 ４ ℃貯藏 ５ ｄ 后，感官評分顯著高于對照組，ｐＨ 和 ＴＶＢ?Ｎ 含量顯著低于對照組；７ ｄ 后，細菌總數顯著低于對照組。 飼喂堅木單寧顯著延長了豬肉的貨架期。