摘 要：為研究水解單寧酸對蛋雞腸道pH值、酶活和菌群的影響。選取30周齡海蘭灰蛋雞4000只，隨機分為5組，每組4個重復，每個重復200只。對照組飼喂基礎日糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的水解單寧酸，試驗期4周。結果表明，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組可顯著降低蛋雞十二指腸和空腸內容物的pH值（P<0.05）。在腸道酶活方面，與對照組相比，試驗Ⅱ組對十二指腸和空腸的脂肪酶活性有顯著影響（P<0.05）；試驗Ⅱ組對十二指腸和空腸淀粉酶活性有顯著影響（P<0.05），試驗Ⅲ組對回腸的淀粉酶活性有顯著影響（P<0.05）；試驗Ⅰ組對十二指腸的蛋白酶活性有顯著的影響（P<0.05），試驗Ⅱ和Ⅲ組對十二指腸、空腸和回腸蛋白酶活性有顯著影響（P<0.05）。在腸道微生物方面，可以使盲腸內有益菌增殖，抑制有害菌的生長，其中試驗Ⅱ和Ⅲ組差異顯著（P<0.05）。研究表明，蛋雞日糧中加入適量的水解單寧酸（1 kg/t）可以有效地降低腸道pH值和提高腸道消化酶活性，增殖有益菌并抑制有害菌，從而達到改善腸道健康的作用。
關鍵詞：水解單寧酸；蛋雞；腸道pH值；腸道酶活；腸道菌群
作者：李 茜，侯海鋒，劉彥慈，鄭長山

單寧酸是一種分子量為500~3 000的能沉淀蛋白質、生物堿的多酚化合物，易溶于水、乙醇、丙酮和甘油等，微有特殊氣味，具強烈的澀味（朱子潔，2013）。單寧酸根據化學結構可分為水解單寧酸和縮合單寧酸兩種，縮合單寧酸具有較強的抗營養吸收作用，被認為是飼料中的抗營養因子，水解單寧酸除了具有促進傷口愈合、收斂和消毒作用外，還具有抗炎、抗氧化及促進吸收和促進生長作用（雷劍等，2007；鄧奇風等，2015）。本研究通過研究水解單寧酸對蛋雞腸道pH值、酶活性和菌群的影響，以探討其對蛋雞腸道健康的影響，并確定其在蛋雞日糧中的最佳添加量，為水解單寧酸在蛋雞生產中的應用提供理論依據，對拓寬飼料添加劑種類具有理論和實踐意義。

1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗用水解單寧酸，純度≥75.00%，廣東施華特貿易有限公司生產。
1.2 試驗動物和分組
試驗分組完全隨機，抽取4 000只30周齡海蘭灰蛋雞，分為對照組和試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組4個重復，每個重復200只雞。
1.3 試驗日糧

基礎日糧為玉米-豆粕型日糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別添加0.05%、0.10%、0.15%和 0.20%的水解單寧酸，日糧組成及營養水平見表1。

1.4 飼養管理
采用階梯式籠養，采用人工光照和自然光照相結合（每天光照16 h），縱向機械通風和自然通風相結合，保持自由采食和自由飲水。預飼期1周，試驗期為4周。
1.5 樣品采集和指標測定
1.5.1 試驗樣品采集
試驗結束后，每重復隨機選2只蛋雞進行屠宰，無菌操作收集十二指腸、空腸、回腸和盲腸的內容物，-80 ℃液氮中保存。
1.5.2 腸道pH值測定
用pHS-3B精密度 pH 計測定十二指腸和空腸內容物的 pH值。
1.5.3 腸道酶活性測定
脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶活性使用南京建成生物工程研究所試劑盒，總蛋白酶活性參照周景祥等（2011）方法。
1.5.4 腸道菌群測定
大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數量以每克盲腸內容物所含的細菌數計算（以lg cfu/g表示）（陳天壽，1995）。每克盲腸內容物細菌量=lg(菌落數×稀釋倍數×每次稀釋取樣毫升數)/ （接種用樣品毫升數×樣品克數)。
1.6 數據分析與處理
采用SPSS軟件進行單因子方差分析，數據以“平均數±標準差”表示。

2 結果與分析
2.1 水解單寧酸對蛋雞腸道內容物pH值的影響
由表2可知，試驗Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組十二指腸和空腸內容物的pH值顯著低于對照組（P<0.05），試驗Ⅰ組則與對照組相比無顯著差異。
2.2 水解單寧酸對蛋雞腸道內脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶活性的影響
由表3可知，與對照組相比，在飼料中添加適量水解單寧酸，可以提高十二指腸和空腸的脂肪酶活性，試驗Ⅱ組影響顯著（P<0.05）；對回腸脂肪酶活性沒有規律性影響。
由表4可知，與對照組相比，在飼料中添加適量水解單寧酸，可以提高十二指腸、空腸和回腸淀粉酶活性，Ⅱ組十二指腸、空腸影響顯著（P<0.05），回腸酶活性影響差異不顯著（P>0.05）。
由表5可知，與對照組相比，在飼料中添加適量水解單寧酸，對十二指腸蛋白酶活性有提高趨勢，其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組效果顯著（P<0.05）；同時提高空腸和回腸蛋白酶活性，其中Ⅱ和Ⅲ組效果顯著（P<0.05）。
2.3 水解單寧酸對蛋雞腸道菌群的影響
由表6可知，與對照組相比，水解單寧酸對蛋雞盲腸各種微生物都是有影響的，其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的大腸桿菌與對照組相比影響顯著（P<0.05），Ⅱ和Ⅲ組的乳酸桿菌和雙歧桿菌與對照組相比影響顯著（P<0.05）。
3 討論
3.1 飼糧中添加水解單寧酸對蛋雞腸道內容物pH值的影響
家禽消化道的消化液主要由腺胃分泌 HCl 以及膽汁和胰液組成（楊寧，2012），其對腸道的 pH值、腸道菌群的數量及消化酶活性都有重要作用（樊紅平等，2013）。飼糧中添加水解單寧酸時，由于水解單寧酸呈弱酸性，使胃中和消化道內的pH 值降低。在本試驗中，0.10%、0.15%和 0.20%水解單寧酸添加組的十二指腸和空腸pH值顯著低于對照組。
3.2 飼糧中添加水解單寧酸對蛋雞腸道內脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶活性的影響
劉華偉（2010）研究表明，飼糧中添加單寧酸可以顯著提高肉兔十二指腸、空腸和回腸中α-淀粉酶的活性，同時也可以提高十二指腸和空腸中胰蛋白酶的活性。陳寶江等（2012）研究發現，在肉雞日糧中添加單寧酸，可顯著提高肉仔雞腸道內淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性，這與本試驗研究結果一致。表明水解單寧酸可以在一定程度上提高蛋雞腸道內的消化酶活性水平。
3.3 飼糧中添加水解單寧酸對蛋雞腸道菌群的影響

研究結果表明，水解單寧酸能夠促進腸道有益菌的生長和增殖，顯著增加腸道乳酸菌和雙歧桿菌的數量；同時間接抑制有害菌的增殖，減少大腸桿菌的數量。這與本研究結果一致，本試驗在飼糧中添加水解單寧酸，顯著增加了乳酸桿菌和雙歧桿菌在腸道內的增殖，有效抑制了大腸桿菌生長。這與單寧酸抑制有害微生物在動物腸道內的定植有關，水解單寧酸可以被有益菌利用，而有害菌幾乎不能利用。許多有害菌的適宜的pH值為中性偏堿，因此降低消化道pH值可抑制有害菌的增殖（劉秀麗，2009）。雙歧桿菌與腸黏膜上皮細胞的相互作用，在腸黏膜表面形成了一層具有屏障保護作用的生物膜，阻止有害菌的入侵，從而起到保護腸黏膜并改善腸道環境的作用（隋慧等，2013）。

4 結論
蛋雞飼糧中添加水解單寧酸能有效地降低腸道pH值和提高腸道消化酶活性，增殖有益菌并抑制有害菌，從而達到改善腸道健康的作用。

參考文獻
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