摘 要：為研究水解單寧酸對蛋雞腸道pH值、酶活和菌群的影響。選取30周齡海蘭灰蛋雞4000只，隨機分為5組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)200只。對照組飼喂基礎(chǔ)日糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別添加0.05%、0.10%、0.15%和0.20%的水解單寧酸，試驗期4周。結(jié)果表明，試驗Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組可顯著降低蛋雞十二指腸和空腸內(nèi)容物的pH值（P<0.05）。在腸道酶活方面，與對照組相比，試驗Ⅱ組對十二指腸和空腸的脂肪酶活性有顯著影響（P<0.05）；試驗Ⅱ組對十二指腸和空腸淀粉酶活性有顯著影響（P<0.05），試驗Ⅲ組對回腸的淀粉酶活性有顯著影響（P<0.05）；試驗Ⅰ組對十二指腸的蛋白酶活性有顯著的影響（P<0.05），試驗Ⅱ和Ⅲ組對十二指腸、空腸和回腸蛋白酶活性有顯著影響（P<0.05）。在腸道微生物方面，可以使盲腸內(nèi)有益菌增殖，抑制有害菌的生長，其中試驗Ⅱ和Ⅲ組差異顯著（P<0.05）。研究表明，蛋雞日糧中加入適量的水解單寧酸（1 kg/t）可以有效地降低腸道pH值和提高腸道消化酶活性，增殖有益菌并抑制有害菌，從而達到改善腸道健康的作用。
關(guān)鍵詞：水解單寧酸；蛋雞；腸道pH值；腸道酶活；腸道菌群
作者：李 茜，侯海鋒，劉彥慈，鄭長山

單寧酸是一種分子量為500~3 000的能沉淀蛋白質(zhì)、生物堿的多酚化合物，易溶于水、乙醇、丙酮和甘油等，微有特殊氣味，具強烈的澀味（朱子潔，2013）。單寧酸根據(jù)化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為水解單寧酸和縮合單寧酸兩種，縮合單寧酸具有較強的抗營養(yǎng)吸收作用，被認為是飼料中的抗營養(yǎng)因子，水解單寧酸除了具有促進傷口愈合、收斂和消毒作用外，還具有抗炎、抗氧化及促進吸收和促進生長作用（雷劍等，2007；鄧奇風(fēng)等，2015）。本研究通過研究水解單寧酸對蛋雞腸道pH值、酶活性和菌群的影響，以探討其對蛋雞腸道健康的影響，并確定其在蛋雞日糧中的最佳添加量，為水解單寧酸在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供理論依據(jù)，對拓寬飼料添加劑種類具有理論和實踐意義。

1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗用水解單寧酸，純度≥75.00%，廣東施華特貿(mào)易有限公司生產(chǎn)。
1.2 試驗動物和分組
試驗分組完全隨機，抽取4 000只30周齡海蘭灰蛋雞，分為對照組和試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組，每組4個重復(fù)，每個重復(fù)200只雞。
1.3 試驗日糧

基礎(chǔ)日糧為玉米-豆粕型日糧，試驗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組分別添加0.05%、0.10%、0.15%和 0.20%的水解單寧酸，日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

1.4 飼養(yǎng)管理
采用階梯式籠養(yǎng)，采用人工光照和自然光照相結(jié)合（每天光照16 h），縱向機械通風(fēng)和自然通風(fēng)相結(jié)合，保持自由采食和自由飲水。預(yù)飼期1周，試驗期為4周。
1.5 樣品采集和指標測定
1.5.1 試驗樣品采集
試驗結(jié)束后，每重復(fù)隨機選2只蛋雞進行屠宰，無菌操作收集十二指腸、空腸、回腸和盲腸的內(nèi)容物，-80 ℃液氮中保存。
1.5.2 腸道pH值測定
用pHS-3B精密度 pH 計測定十二指腸和空腸內(nèi)容物的 pH值。
1.5.3 腸道酶活性測定
脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶活性使用南京建成生物工程研究所試劑盒，總蛋白酶活性參照周景祥等（2011）方法。
1.5.4 腸道菌群測定
大腸桿菌、乳酸桿菌、雙歧桿菌數(shù)量以每克盲腸內(nèi)容物所含的細菌數(shù)計算（以lg cfu/g表示）（陳天壽，1995）。每克盲腸內(nèi)容物細菌量=lg(菌落數(shù)×稀釋倍數(shù)×每次稀釋取樣毫升數(shù))/ （接種用樣品毫升數(shù)×樣品克數(shù))。
1.6 數(shù)據(jù)分析與處理
采用SPSS軟件進行單因子方差分析，數(shù)據(jù)以“平均數(shù)±標準差”表示。

2 結(jié)果與分析
2.1 水解單寧酸對蛋雞腸道內(nèi)容物pH值的影響
由表2可知，試驗Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ組十二指腸和空腸內(nèi)容物的pH值顯著低于對照組（P<0.05），試驗Ⅰ組則與對照組相比無顯著差異。
2.2 水解單寧酸對蛋雞腸道內(nèi)脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶活性的影響
由表3可知，與對照組相比，在飼料中添加適量水解單寧酸，可以提高十二指腸和空腸的脂肪酶活性，試驗Ⅱ組影響顯著（P<0.05）；對回腸脂肪酶活性沒有規(guī)律性影響。
由表4可知，與對照組相比，在飼料中添加適量水解單寧酸，可以提高十二指腸、空腸和回腸淀粉酶活性，Ⅱ組十二指腸、空腸影響顯著（P<0.05），回腸酶活性影響差異不顯著（P>0.05）。
由表5可知，與對照組相比，在飼料中添加適量水解單寧酸，對十二指腸蛋白酶活性有提高趨勢，其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組效果顯著（P<0.05）；同時提高空腸和回腸蛋白酶活性，其中Ⅱ和Ⅲ組效果顯著（P<0.05）。
2.3 水解單寧酸對蛋雞腸道菌群的影響
由表6可知，與對照組相比，水解單寧酸對蛋雞盲腸各種微生物都是有影響的，其中Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ組的大腸桿菌與對照組相比影響顯著（P<0.05），Ⅱ和Ⅲ組的乳酸桿菌和雙歧桿菌與對照組相比影響顯著（P<0.05）。
3 討論
3.1 飼糧中添加水解單寧酸對蛋雞腸道內(nèi)容物pH值的影響
家禽消化道的消化液主要由腺胃分泌 HCl 以及膽汁和胰液組成（楊寧，2012），其對腸道的 pH值、腸道菌群的數(shù)量及消化酶活性都有重要作用（樊紅平等，2013）。飼糧中添加水解單寧酸時，由于水解單寧酸呈弱酸性，使胃中和消化道內(nèi)的pH 值降低。在本試驗中，0.10%、0.15%和 0.20%水解單寧酸添加組的十二指腸和空腸pH值顯著低于對照組。
3.2 飼糧中添加水解單寧酸對蛋雞腸道內(nèi)脂肪酶、淀粉酶和蛋白酶活性的影響
劉華偉（2010）研究表明，飼糧中添加單寧酸可以顯著提高肉兔十二指腸、空腸和回腸中α-淀粉酶的活性，同時也可以提高十二指腸和空腸中胰蛋白酶的活性。陳寶江等（2012）研究發(fā)現(xiàn)，在肉雞日糧中添加單寧酸，可顯著提高肉仔雞腸道內(nèi)淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶活性，這與本試驗研究結(jié)果一致。表明水解單寧酸可以在一定程度上提高蛋雞腸道內(nèi)的消化酶活性水平。
3.3 飼糧中添加水解單寧酸對蛋雞腸道菌群的影響

研究結(jié)果表明，水解單寧酸能夠促進腸道有益菌的生長和增殖，顯著增加腸道乳酸菌和雙歧桿菌的數(shù)量；同時間接抑制有害菌的增殖，減少大腸桿菌的數(shù)量。這與本研究結(jié)果一致，本試驗在飼糧中添加水解單寧酸，顯著增加了乳酸桿菌和雙歧桿菌在腸道內(nèi)的增殖，有效抑制了大腸桿菌生長。這與單寧酸抑制有害微生物在動物腸道內(nèi)的定植有關(guān)，水解單寧酸可以被有益菌利用，而有害菌幾乎不能利用。許多有害菌的適宜的pH值為中性偏堿，因此降低消化道pH值可抑制有害菌的增殖（劉秀麗，2009）。雙歧桿菌與腸黏膜上皮細胞的相互作用，在腸黏膜表面形成了一層具有屏障保護作用的生物膜，阻止有害菌的入侵，從而起到保護腸黏膜并改善腸道環(huán)境的作用（隋慧等，2013）。

4 結(jié)論
蛋雞飼糧中添加水解單寧酸能有效地降低腸道pH值和提高腸道消化酶活性，增殖有益菌并抑制有害菌，從而達到改善腸道健康的作用。

參考文獻
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