摘 要：本研究旨在探討有機酸與植物精油復配使用對斷奶仔豬生產性能、腹瀉率、腸道結構和腸道微生物菌群的影響。研究選擇 120 頭 28 日齡的健康三元雜交斷奶仔豬 ( 平均體重 8.56 kg±0.32 kg)，隨機分為 4 組，每組 3 個重復，每個重復 10 頭仔豬。對照組飼喂普通基礎日糧，試驗Ⅰ、試驗Ⅱ和試驗Ⅲ組分別在普通基礎日糧基礎上添加 0.3％復合有機酸、0.02％的植物精油、0.15％的有機酸和植物精油復配物，試驗為期 35 d。結果表明，在整個試驗期中，與對照組相比，有機酸和植物精油復配物組能夠顯著提高仔豬日增重和日采食量，極顯著降低料肉比以及盲腸和回腸中大腸桿菌菌群數，極顯著增加盲腸和回腸中乳酸桿菌菌群數，可顯著增加空腸和回腸的絨毛高度 (Villous Height，VH)，顯著降低兩者的隱窩深度 (Crypt Depth，CD)，極顯著提高 VH/CD 值。因此，有機酸化劑和植物精油配合使用可改善斷奶仔豬生產性能和腸道健康。
關鍵詞：有機酸；植物精油；斷奶仔豬；腸道健康  作者：陳麗媛

斷奶仔豬腹瀉一直是阻礙養豬業發展的重要因素之一。中國于 2020 年將全面禁止在飼料中使用抗生素，因此以往使用抗生素解決斷奶仔豬腹瀉的方法即將被淘汰。酸化劑是一種用于緩解斷奶仔豬胃酸分泌不足的重要飼料添加劑，其可提供大量氫離子降低胃腸道 pH，而較低的 pH 和部分有機酸具有抑菌作用，但作用有限。然而，抑菌作用最突出的植物精油可彌補酸化劑的抑菌弱勢，研究表明較低 pH 會增加植物精油的抑菌效果[1] 。因此，將有機酸和植物精油復配，可以最大化地發揮產品的抑菌效果。在斷奶階段使用復配有機酸和植物精油，不但可降低仔豬胃酸不足引起的營養性腹瀉，也可降低腸道菌群紊亂導致的細菌性腹瀉[2] 。同時，有機酸和植物精油的配合使用也可以降低部分抗生素的使用[3] 。本研究通過動物試驗探討有機酸和植物精油復配使用對斷奶仔豬生長性能和腸道健康的影響。

1 材料與方法
1.1 試驗材料
復合有機酸 ( 有效成分為苯甲酸 9％、富馬酸 5％、乳酸鈣 24％、甲酸鈣 20％和二氧化硅 10％等 )、植物精油 ( 有效成分為香芹
酚 30％、百里香酚 45％等 ) 和有機酸以及植物精油復配物 ( 有效成分為乳酸鈣 20％、檸檬酸 10％、苯甲酸 20％、香芹酚 8％、百里香酚 13.5％等 ) 等產品。

1.2 飼養管理與試驗動物
試 驗 選 擇 120 頭 28 日 齡、 體 重 介 于7.91 kg ～ 9.12 kg 的健康三元雜交斷奶仔豬( 公豬去勢，公母比例 1 ∶ 1)，從仔豬 28 日齡開始試驗，試驗期為 35 d。高床漏縫地板飼養，半開放豬舍，自然通風與機械通風結合，自由飲水采食。免疫程序按豬場常規程序進行。每日 7:00 收集稱量余料，并投喂新料，每日 10:00、14:00 和 17:30 觀察試驗豬的健康及采食狀況，記錄豬的腹瀉情況，適時添加新料。

1.3 試驗設計
按照體重相近、公母比例為 1 ∶ 1 和隨機分組的原則，120 頭 28 日齡的斷奶仔豬被分入 4 個處理組，每個處理設 3 個重復，每個
重復 10 頭豬 ( 表 1)。試驗期共計 35 d，空腹采樣于試驗結束后早上 8:00 進行?；A日糧為玉米—豆粕型日糧，參照NRC(1998) 的斷奶仔豬營養需要量要求配制，其日糧組成與營養水平見表 2。試驗日糧的形態均為粉料，飼料配制于江蘇奧邁生物科技有限公司。

1.4 測定指標與方法
1.4.1 生長性能
平 均 日 增 重 (Average Daily Gain，ADG)：在試驗開始當天 8:10 和結束日 8:10對試驗仔豬進行稱重和記錄體重，用于計算平均日增重。平均日增重 =( 末重 - 初重 )/ 試驗天數。每日平均采食量 (Average Daily FeedIntake，ADFI)：每天記錄每欄斷奶仔豬的余料量和喂料量，用于計算平均日采食量。平均日采食量 = 總采食量 /( 試驗天數 × 試驗豬頭數 )。
料重比 (Feed/Gain，F/G)= 總飼料消耗量 /( 末重 - 初重 )。
腹瀉率：每天觀察仔豬肛門的清潔程度，肛門處存在水樣糞污，鑒定為腹瀉，并且記錄發生腹瀉仔豬的頭數。腹瀉率 =( 腹瀉總次數 / 試驗天數 × 試驗仔豬總頭數 )×100％。

1.4.2 組織取樣和檢測方法
試驗結束當天 8:30，每個處理組隨機選擇 1 頭仔豬供屠宰。屠宰后立即剖開腹腔，分離出胃、十二指腸、空腸、回腸和盲腸，分離
和收集回腸和盲腸內容物各 1 g，并冷凍保存?？漳c和回腸中段各截取 5 cm 腸段組織樣品，迅速置于 10％甲醛溶液中固定 8 h ～ 24 h。

微生物平板培養基數：采集的 1 g 回腸內容物和 1 g 盲腸內容物分別放入盛有 99 mL 滅菌生理鹽水的三角燒瓶中，震蕩混勻后，進行 10 倍遞進稀釋，從 10 -2 倍稀釋到 10 -7 倍。將內容物各稀釋液接種在準備好的乳酸桿菌和伊紅美藍養基上，每個樣品梯度設 3 個重復。MRS 培養基平板放置于 37 ℃厭氧培養箱中、培養 48 h，EMB 培養基平板在 37 ℃培養箱內需氧培養 24 h，然后進行菌落計數。

在 10％甲醛溶液中固定 8 h ～ 24 h 的腸段先經切片和染色處理，然后封藏于中性樹膠中，在熒光生物顯微鏡下觀察拍照，使用圖像處理軟件對空腸和回腸絨毛高度 (VillousHeight，VH) 和隱窩深度 (Crypt Depth，CD)進行測量。

1.5 數據處理
試驗數據用 Excel 和 SPSS 16.0 軟件整理與分析，分析方法為 ANOVA 單因子方差分析和Duncan’s 多重檢驗，以 P ＜ 0.05 和 P ＜ 0.01分別作為差異顯著和極顯著的判斷標準。

2 結果與分析
2.1 有機酸和植物精油對斷奶仔豬生產性能的影響
由表 3 可知，動物分組時仔豬體重差異不顯著。經 35 d 飼養試驗后，與對照組相比，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的試驗豬末重有所提高，但差異不顯著；試驗Ⅲ組的試驗豬末重提高了 3.49 kg，差異顯著。與對照組相比，試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組試驗豬的日增重顯著增加，分別提高了 49.14 g 和 59.71 g，試驗Ⅲ組的試驗豬日增重極顯著地提高，達到102.28 g。與對照組比較，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組的試驗豬在每日平均采食量上均有極顯著增加，分別增加了51.02 g、59.56 g和 100.79 g。在料肉比方面，試驗Ⅲ組較對照組差異極顯著，料肉比為 1.65 ∶ 1。在腹瀉率方面，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組較對照組均有極顯著降低，并且試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組與試驗Ⅲ組之間差異顯著。
2.2 有機酸和植物精油對斷奶仔豬腸道健康的影響
有機酸和植物精油對斷奶仔豬腸道健康的影響見表 4。由表 4 可知，在豬回腸大腸桿菌群數上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組較對照組顯著降低，分別降低了 17.8％、21.1％和23.9％；在豬回腸道乳酸桿菌菌群數上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組則顯著增加，分別比對照組增加為 22.8％、29.8％和 33.7％。在盲腸大腸桿菌菌群數上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組均比對照組有所降低，其中試驗Ⅰ組和Ⅱ組顯著降低，試驗Ⅲ組極顯著降低，降低了 26.1％；在盲腸乳酸桿菌菌群數上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組較對照組均有所增加，其中試驗Ⅰ組和Ⅱ組增加顯著，試驗Ⅲ組增加極顯著，增加了 16.9％。
如表 5 所示，在空腸 VH 和回腸 VH 上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組的試驗豬均比對照組豬有所增加，且試驗Ⅲ組的試驗豬腸道 VH 顯著增加；在空腸 CD 和回腸 CD 上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組的試驗豬比對照組豬均有所降低，其中試驗Ⅲ組空腸CD極顯著降低，降低高達 20.0％，回腸 CD 顯著降低；在空腸和回腸的 VH/ CD 值上，試驗Ⅰ組、試驗Ⅱ組和試驗Ⅲ組均對照組所增加，其中試驗Ⅰ組和試驗Ⅱ組的 VH/CD 值顯著增加，試驗Ⅲ組極顯著增加。
3 討論
3.1 有機酸和植物精油對斷奶仔豬生產性能的影響
有機酸加入飼料后會釋放大量氫離子，彌補胃酸不足；胃內 pH 低于 3.5 時，胃蛋白酶原活性增強，飼料蛋白質分解率提高。同時，蛋白質分解產物增多會增加胰蛋白酶的分泌量，進而減慢胃排空的速度，即蛋白質消化吸收更充分，從而可提高仔豬生長性能。蘇永騰
等研究表明，斷奶仔豬日糧添加0.3％～0.5％的復合有機酸化劑后，仔豬日增重極顯著提高，料肉比的降低效果極顯著，斷奶仔豬生產性能得到改善[4] 。本研究表明，斷奶仔豬日糧添加復合有機酸后，仔豬日增重顯著增加，每日平均采食量極顯著地提高，腹瀉率極顯著降低。

香芹酚和百里香酚具有揮發性芳香氣味，可掩蓋日糧中的不良味道，改善日糧的適口性，增加采食量[5] 。但是，百里香酚略帶苦味，高水平添加會降低仔豬的采食量。Trevisi 在研究百里香酚在斷奶仔豬生長性能的相關研究中發現，日糧添加百里香酚后，仔豬 ADFI
和 ADG 有所降低，但 F/G 有所改善[6] 。刁慧研究發現，日糧添加 1 000 mg/kg 的苯甲酸和 100 mg/kg 百里香酚后，斷奶仔豬的采食量并未受到顯著的影響，但料肉比顯著降低[7] 。本研究中，日糧在添加 0.02％的植物精油后，仔豬的 ADG 顯著提高，ADFI 極顯著地增加；當日糧添加 0.15％有機酸和植物精油復配物后，試驗豬的 ADG 和 ADFI 均極顯著地提高，料肉比和腹瀉率極顯著降低。

3.2 有機酸和植物精油對斷奶仔豬腸道健康的影響
動物胃腸道微生物菌群在機體營養供應和促進生長上都具有極其重要的作用，胃腸道微生物菌群平衡與機體健康密切相關。大腸桿菌作為機體消化道內的正常菌，正常情況下不會誘發疾病，但是數量增多或大腸桿菌的某些菌株可導致腹瀉的發生。胃腸道較低的 pH 可減少腸道的病原微生物如大腸桿菌的數量[8] 。研究表明飼料添加苯甲酸后，回腸和盲腸內容物中大腸桿菌的數量會顯著減小，盲腸中的乳酸桿菌數量增加，腸道微生物菌群平衡得到改善[7] 。本研究中，日糧添加0.3％的有機酸后，試驗豬回腸和盲腸中的大腸桿菌數量顯著地降低，而乳酸桿菌的數量增加，從而改善了腸道微生物菌群結構。

植物精油可裂解細菌細胞膜和線粒體的脂質層，增加細菌細胞膜的滲透性，使細菌內容物溢出，達到抑菌殺菌的效果。Michiels等在體外試驗中發現，百里香酚可顯著降低動物空腸、盲腸中總厭氧菌的數量 ( 如梭菌、球菌 )，顯著提高空腸中的乳酸桿菌數量[9] 。韓慶功等研究發現，飼料添加牛至油后，仔豬糞便中的大腸桿菌含量減少，乳酸桿菌和雙歧桿菌等腸道有益菌含量增多[10] 。植物精油和有機酸具有協同效應，細菌細胞壁可被植物精油破壞，使有機酸能夠更多地進入病原菌內部，造成細菌死亡[11] 。Akyurek等研究發現，日糧添加有機酸和植物精油后，肉雞回腸乳酸桿菌和酵母菌的含量顯著增加，并且植物精油與有機酸混合添加后，其促進腸道乳酸
桿菌生長的效果優于單獨添加植物精油[12] 。本研究表明，日糧添加 0.15％的有機酸與植物精油復配物，斷奶仔豬的回腸和盲腸中大腸桿菌含量極顯著減少，而乳酸桿菌的數量極顯著增加，產生的效果優于單獨使用有機酸和植物精油。

精胺作為一種黏膜上皮細胞的生長因子，增加日糧中的濃度可改善動物腸道的結構，而植物精油的使用可增加動物盲腸精胺的濃度。冉關平等研究發現，復合植物精油可顯著提高斷奶仔豬十二指腸、空腸和回腸的 VH，顯著降低回腸的 CD [13] 。杜恩存在肉仔雞的亞臨
床型壞死性腸炎研究中發現，日糧添加植物精油后，肉雞腸道損傷得到減輕，小腸的組織形態得到改善[14] 。本研究發現，日糧添加0.02％的植物精油，試驗豬腸道的 VH/CD 值得到顯著提高；日糧添加 0.15％的有機酸和植物精油復配物后，試驗豬腸道的 VH/CD 值得到了極顯著提高，腸道形態改善。

4 結論
向日糧中添加有機酸和植物精油復配可顯著改善斷奶仔豬的生長性能，提高腸道健康。同時，有機酸與植物精油的配合使用可降低飼料中酸化劑和植物精油的添加量。