摘 要: 本試驗旨在研究植物多酚對黃羽肉雞抗氧化性能、腸道形態及肉品質的影響。選取 1日齡雄性黃羽肉雞 288 只，隨機分為 4 組，每組 6 個重復，每個重復 12 只。各組分別飼喂基礎飼糧( 對照組) 、基礎飼糧 +100 g /t 抗敵素( 抗生素組) 、基礎飼糧 +500 mg /kg 植物多酚( BP500組) 和基礎飼糧 +1 000 mg /kg 植物多酚( BP1000 組) 。試驗期 56 d。結果表明: 1) 21 日齡時，BP500 組和 BP1000 組肉雞血清中過氧化氫酶( CAT) 活性顯著高于抗生素組( P＜0．05) ; 56 日齡時，BP1000 組肉雞血清中 CAT 活性顯著高于其他 3 組( P＜0．05) 。2) 21 日齡時，BP500 組和BP1000 組肉雞回腸絨毛高度/隱窩深度( V /C) 顯著低于抗生素組( P＜0．05) ; 56 日齡時，BP500組肉雞回腸 V /C 顯著高于對照組和抗生素組( P＜0．05) 。3) 56 日齡時，BP1000 組胸肌肉色紅度( a * ) 值顯著高于其他 3 組( P＜0．05) ，BP500 組和 BP1000 組胸肌失水率顯著低于其他 2 組( P＜0．05) ，BP500 組和 BP1000 組胸肌 24 h 滴水損失顯著低于其他 2 組( P＜0．05) ，BP1000 組胸肌 48 h 滴水損失顯著低于對照組和抗生素組( P ＜ 0．05) 。由此可見，飼糧添加 500 和1 000 mg /kg的植物多酚均能改善黃羽肉雞腸道形態，提高機體的抗氧化能力，并改善雞肉品質。植物多酚的推薦添加量為 1 000 mg /kg。
關鍵詞: 植物多酚; 黃羽肉雞; 抗氧化性能; 腸道形態; 肉品質
作者：吳姝 ，蔣步云，宋澤和 ，侯德興 ，施壽榮，賀喜

抗生素自從被廣泛應用于動物生產以來，在防治畜禽疾病和促進生長等方面發揮了重要作用，極大地提高了養殖經濟效益。但隨著畜牧業的快速發展，長期低劑量預防用藥或過量使用、濫用抗生素等現象普遍存在，造成畜禽體內殘留和蓄積毒素、致病菌產生耐藥性、動物免疫力下降等問題日益突出，嚴重威脅人類健康。近年來超級耐藥菌的出現給人類敲響了警鐘，因此開發綠色、環保、無毒副殘留的抗生素的替代品已刻不容緩。

植物多酚是一類天然植物提取物，廣泛存在于植物體內，具有多元酚結構，是一類天然抗氧化劑，可以清除體內有害自由基的大量產生，激活體內抗氧化防衛系統 ［1－2］ 。前人研究報道，在飼糧中添加植物多酚，不僅能改善畜禽的健康和產品的質量，而且不易出現有害殘留和毒副作用 ［3－5］ 。因此，來源廣、成本低的植物多酚，可作為純天然、無污染、無殘留、無耐藥性的抗生素替代物，有較廣泛的市場前景和應用潛力，是未來飼料行業發展的必然趨勢，對畜牧業穩定、持續、健康發展具有重要意義。在家禽上，植物多酚作為飼料添加劑也能促進家禽的生長性能、免疫機能和抗氧化性能，改善肉品質和腸道形態 ［6－9］ 。但目前只有少數植物多酚成分在畜禽中的應用效果得到了證實，仍需開展更多的應用。因此本實驗室自制了一種聚合植物多酚，通過在飼糧中添加不同水平的該聚合植物多酚，探討其對黃羽肉雞抗氧化性能、腸道形態及肉品質的影響，為植物多酚在家禽飼糧中的應用提供理論依據。

1 材料與方法
1．1 試驗材料
植物多酚為本實驗室自制，主要成分為單多酚(黃酮類)和復合多酚(原花青素類)，實測總酚含量為 11．59 mg /g，對二苯代苦味酰基(DPPH)自由基清除能力為 1．97 倍 Trolox 當量。
1．2 試驗設計
選取健康 1 日齡雄性黃羽肉雞(快大型黃羽肉雞，廣東溫氏集團培育)288 只，隨機分為 4 組，每組 6 個重復，每個重復 12 只，各重復之間體重接近(P＞0．05)。對照組飼喂基礎飼糧，參照 NＲC(1994) 和《黃雞飼養標準》(NY /T 33—2004) 中黃羽肉雞營養需要配制，基礎飼糧組成及營養水平見表 1;抗生素組飼喂基礎飼糧 +100 g /t 抗敵素，試驗組分別飼喂基礎飼糧 +500 mg /kg 植物多酚(BP500 組)和基礎飼糧 +1000 mg /kg 植物多酚(BP1000 組)。試驗期 56 d，分為1～21日齡和22～56日齡2個階段。
                                                                     
1．3 飼養管理
試驗雞采用上、中、下 3 層籠養，鍋爐控溫(第1 天 33 ℃，第 1 周 30～32 ℃，第 2 周 27～29 ℃，第3 周 24～26 ℃，以后 20 ～ 21 ℃)，人工光照，自然通風，自由飲水與采食并計量不限量，按正常免疫程序進行免疫接種。每天觀察記錄雞群行為及健康狀況，同時記錄每天雞舍中的溫度和濕度。
1．4 檢測指標
1．4．1 血清抗氧化指標
于 21 和 56 日齡每個重復隨機選取 1 只雞，翅靜脈采血，室溫靜置 2 h，3 000 r/min 離心 10 min，分離得血清，－20 ℃ 冰箱保存待測。測定血清中過氧化氫酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活性及總抗氧化能力(T-AOC)和丙二醛(MDA)含量，所用試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。
1．4．2 抗體水平
新城疫(NDV)疫苗一免于 14 日齡采用飲水方式進行，二免于 28 日齡同樣采用飲水方式完成。于一免后第 14 天和二免后第 5、9、13 天翅靜脈采血，血液經低溫離心后分離血清，－20 ℃ 保存，采用酶聯免疫吸附測定( ELISA) 法測定抗NDV 抗體水平。
1．4．3 腸道形態指標
于 21 和 56 日齡屠宰后，取 1 cm 左右空腸末端腸段和回腸中部腸段，放入 10%福爾馬林中固定。取固定 24 h 后的腸段樣品，經過沖水、梯度酒精脫水、二甲苯透明、石蠟包埋等處理后，以 6 μm的厚度切片，常規蘇木精 － 伊紅(HE)染色，最后中性樹脂封片。生物顯微鏡下觀察腸道形態變化，選取 3 處完整且走向平直的絨毛，測定絨毛高度(villous height)和隱窩深度(crypt depth)，并計算絨毛高度/隱窩深度(V /C)。
1．4．4．1 失水率
于 56 日齡屠宰后，取右側胸肌，采用加壓法測定失水率。沿肌纖維垂直方向切一塊 1 cm ×1 cm×1 cm 的方形肉粒，稱重(W 1 );將肉粒置于 2層醫用紗布之間，上下各墊 18 層濾紙(中速定性分析濾紙)，夾于鐵板中，放在改裝的鋼化允許膨脹壓縮儀的平臺上，加壓至 35 kg 保持 5 min，撤除壓力后取肉樣稱重(W 2 )。
失水率(%)= ［(W 1－W2 ) /W 1 ］×100。
1．4．4．2 滴水損失
于 56 日齡屠宰后，取右側胸肌，修剪為 2 cm×2 cm×1 cm 的肉塊，稱重(W 1 )，然后用細鐵絲鉤住肉樣一端，使肌纖維垂直向下，鐵絲另一端從塑料杯底部穿過，使肉樣懸于塑料杯內，用保鮮袋裝好塑料杯，扎好袋口，置于 4 ℃冰箱。24 h 后取出肉樣，用潔凈濾紙輕輕拭去肉樣表層水分后稱重(W 2 )。把稱量后的肉樣重新掛回放入冰箱，再過24 h 后取出肉樣，用濾紙拭去肉樣表層汁液后稱重(W 3 )。
24 h 滴水損失(%)= ［(W 1－W2 ) /W 1 ］×100;
48 h 滴水損失(%)= ［(W 1－W3 ) /W 1 ］×100
1．4．4．3 肉色
于 56 日齡屠宰后，取左側胸肌，30～45 min 后采用 CＲ－400 型色差儀(日本 Konica Minolta 公司)測定靠近骨側肌肉表面的亮度(L*)、紅度(a * )和黃度(b * )值，測定 3 次，取平均值作為最終結果。
1．4．4．4 pH
于 56 日齡屠宰后，取左側胸肌，45 min 后將Testo－205 便攜式 pH 計(德國 Testo 公司)的電極完全包埋到肉樣中，使其與肌肉中的組織液充分接觸，待 pH 計讀數穩定后記錄 pH 值。然后將肌肉放至 4 ℃ 冰箱中保存，24 h 后再測定 1 次。每個肉樣測定 3 次，取平均值作為最終結果。
1．4．5．5 肌肉 MDA 含量
于 56 日齡屠宰后，取右側胸肌 10 g 左右，用錫箔紙包好，液氮速凍后轉至 －20 ℃ 冰箱保存，待測肌肉 MDA 含量，所用試劑盒購于南京建成生物工程研究所。
1．5 數據統計分析
試驗數據用平均值±標準差表示，采用 SPSS19．0 軟件對所有數據進行單因素方差分析，對差異顯著者進行 Duncan 氏法多重比較。P＜0．05 為差異顯著。

2 結 果
2．1 植物多酚對黃羽肉雞血清抗氧化指標的影響
植物多酚對 21 和 56 日齡黃羽肉雞血清抗氧化指標的影響見表 2。21 日齡時，BP500 組和BP1000 組肉雞血清中 CAT 活性顯著高于抗生素組(P＜0．05);56 日齡時，BP1000 組肉雞血清中CAT 活性顯著高于其他 3 組(P＜0．05)。
2．2 植物多酚對黃羽肉雞血清抗體水平的影響
植物多酚對肉雞抗體水平的影響見表 3。一免后第 14 天(28 日齡) 時，對照組肉雞血清抗NDV 抗體水平顯著高于抗生素組和 BP1000 組(P＜0．05)，BP500 組抗 NDV 抗體水平略高于抗生素組和 BP1000 組(P＞0．05)。二免后第 9 天(37日齡)時，BP500 組抗 NDV 抗體水平顯著高于其他各組(P＜0．05);二免后第 5 天(33 日齡) 和第13 天(51 日齡)時，各組抗 NDV 抗體水平均差異不顯著(P＞0．05)。
2．3 植物多酚對黃羽肉雞腸道形態的影響
植物多酚對 21 和 56 日齡肉雞腸道形態的影響見圖 1、圖 2 和表 4。由圖 1 和圖 2 可知，各組空腸和回腸絨毛大致呈指狀和柱狀;對照組和抗生素組 2 段腸道的絨毛發育不良，大多排列不規則，粗短且有較多脫落的現象;而 BP500 組和 BP1000組的 2 段腸道絨毛較長，排列整齊緊密，絨毛間界限清晰;總體來看，BP500 組腸絨毛發育較好。
由表 4 可知，21 日齡時，對照組的空腸隱窩深度最深，顯著大于抗生素組(P＜0．05)，抗生素組最淺，BP500 組、BP1000 組與其他各組無顯著差異(P＞0．05);抗生素組的回腸絨毛高度最短，顯著低于對照組(P＜0．05)，對照組的回腸絨毛高度最高，BP500 組與 BP1000 組無顯著差異(P＞0．05);抗生素組和 BP500 組的回腸隱窩深度顯著小于對照組和 BP1000 組(P＜0．05);抗生素組的回腸 V /C顯著高于其他 3 組(P＜0．05)。56 日齡時，BP500組的回腸絨毛高度最短，顯著低于抗生素組和BP1000 組(P＜0．05)，抗生素組的回腸絨毛高度最高，對照組與 BP1000 組無顯著顯著(P＞0．05);BP500 組的回腸隱窩深度顯著低于其他 3 組(P＜0．05);BP500 組的回腸 V /C 顯著高于對照組和抗生素組(P＜0．05)。

               

  

2．4 植物多酚對黃羽肉雞肉品質的影響
植物多酚對 56 日齡黃羽肉雞肉品質的影響見表 5。BP1000 組的胸肌肉色 a * 值顯著高于其他各組(P＜0．05)。BP500 組和 BP1000 組的胸肌失水率顯著低于對照組和抗生素組(P＜0．05)。BP500 組和 BP1000 組的胸肌 24 h 滴水損失顯著低于對照組和抗生素組(P＜0．05)，BP1000 組的胸肌 48 h 滴水損失顯著低于對照組和抗生素組(P＜0．05)。

3 討 論
3．1 植物多酚對黃羽肉雞血清抗氧化指標的影響

本 研 究 結 果 表 明，飼 糧 中 添 加 500 和1000 mg /kg植物多酚增強了肉雞機體的抗氧化性能。舒剛 ［10］ 研究表明，竹葉黃酮顯著提高了肉雞血清 SOD、CAT 的活性及 T-AOC，并降低了血清MDA 含量;李紅等 ［11］ 研究表明，飼糧中添加 0．3%的板栗總苞多酚能夠顯著提高肉雞抗氧化能力。本試驗結果與這些關于植物多酚(茶多酚)抗氧化作用的報道基本一致。植物多酚具有抗氧化作用主要是由于其結構中包含多個易被氧化的酚羥基，可直接與自由基和氧化物結合從而清除自由基、抑制脂質過氧化，或促進體內抗氧化系統，間接清除自由基［12－13］ 。

    

3．2 植物多酚對黃羽肉雞抗體水平的影響
抗體水平在一定程度上反映了機體的體液免疫能力。本研究結果顯示，一免后第 14 天時，BP1000 組抗 NDV 抗體水平顯著高于對照組;二免后第 9 天時，BP500 組抗 NDV 抗體水平顯著高于其他各組，表明植物多酚對黃羽肉雞的體液免疫反應有一定影響。該試驗結果中植物多酚對機體體液免疫的促進作用與李振等 ［14］ 、馬美湖 ［15］ 和丘光恒等 ［16］ 的報道相似。大多數人認為植物多酚調節機體免疫功能的具體機制是通過植物多酚本身的抗氧化特性來保護機體的生物膜不受自由基的破壞，從而保持了膜的流動性，使機體處于一個動態的氧化還原平衡的狀態中。
3．3 植物多酚對黃羽肉雞腸道形態的影響
小腸絨毛是直接執行吸收功能的部位，絨毛高度與細胞數量顯著相關。腸絨毛高度的增加能夠使小腸吸收營養物質的面積增大，所以腸絨毛的長短直接關系著動物的生長發育。只有成熟的絨毛上皮細胞才具有養分吸收功能，因此絨毛短時，成熟細胞少，養分吸收能力低 ［17－19］ 。小腸隱窩是絨毛根部上皮陷入固有層形成的管狀腺體。隱窩深度主要是反映上皮細胞的生成率，上皮細胞不斷從隱窩基部向絨毛端部移動，形成具有吸收能力的新絨毛細胞，以補充正常的細胞脫落。如果此過程減慢，則基部的細胞生成率降低，使隱窩變深 ［20－21］ 。V /C 則綜合反映小腸絨毛吸收功能。V /C 下降，表示消化吸收功能下降，常伴隨腹瀉的發生;V /C 上升，消化吸收功能增強，腹瀉率下降 ［22－23］ 。在本試驗中，BP1000 組 21 日齡肉雞回腸絨毛高度顯著高于抗生素組;飼糧中添加 500和 1000 mg /kg 植物多酚可提高 56 日齡肉雞回腸V/C。這表明植物多酚可一定程度改善黃羽肉雞腸道形態，與孫丹鳳 ［9］ 、李登輝［24］ 和原澤鴻［25］的研究結果一致
3．4 植物多酚對黃羽肉雞肉品質的影響
肌肉肉色 a * 值的大小說明肌肉中肌紅蛋白含量的高低和存在的狀態;肌肉系水力是肌肉組織保持水分的能力，是作為評定禽肉肉質的重要指標，目前多采用失水率、滴水損失、烹調損失或熟肉率來評定家禽肌肉系水力;脂類過氧化是肉品質降低的主要原因之一，MDA 是肌肉中脂類過氧化最重要的產物之一。蔣守群 ［7］ 在嶺南黃羽肉雞飼糧中添加 40 mg /kg 大豆異黃酮可使宰后24 h時肉雞胸肌的肉色 a * 值略有增高，提高了胸肌系水力，并降低了胸肌中 MDA 含量。宋揚等 ［26］ 報道，飼糧中添加泡桐花黃酮提取物可改善愛拔益加肉
雞肌肉的系水力。在本試驗中，BP1000 組肉色 a *值顯著高于其他 3 組，表明植物多酚可一定程度上抑制肌紅蛋白過氧化成高鐵蛋白，使雞肉保持肉色的穩定性;BP500 組和 BP1000 組黃羽肉雞肌肉失水率和滴水損失均顯著降低，表明植物多酚可提高肌肉對水分的束縛能力;飼糧中添加植物多酚有降低雞胸肌中 MDA 含量的趨勢，說明植物多酚可在一定程度上抑制脂類過氧化，保持雞肉的新鮮程度。總之，本試驗結果與國內一些關于植物多酚改善雞肉品質的報道基本一致。

4 結 論
① 飼糧中添加 500 和 1 000 mg /kg 植物多酚均顯著提高了黃羽肉雞血清抗氧化酶 CAT 的活性，從而增強了黃羽肉雞的抗氧化性能;其中添加1000 mg /kg 的效果更優。
② 飼糧中添加 500 和 1 000 mg /kg 植物多酚均在一定程度上提高了黃羽肉雞抗NDV抗體水平。
③ 飼糧中添加 500 和 1 000 mg /kg 的植物多酚均能改善肉雞腸道形態，且添加 1 000 mg /kg 的效果更優。
④ 飼糧中添加 500 和 1 000 mg /kg 植物多酚均能夠改善黃羽肉雞肉品質，且添加 1 000 mg /kg的效果更優

⑤ 綜合考慮，飼糧中植物多酚的添加量以1000 mg /kg為宜。

參考文獻（略）